对血液分析是临床医学检查中最基本最重要的项目,检测内容包括对红细胞、白细胞和血小板等血细胞计数项目以及血红蛋白浓度的测定。这类通过电脑控制可实现血液分析全自动化的装置通常被称为血液分析仪。血细胞计数最初是使用显微镜对显微镜视野内的各种细胞以人工目视的方法进行计数。1953年美国Coulter公司成功研制出世界第一台自动电阻式“流体中悬浮颗粒分析仪”,之后技术不断革新,近年来许多血细胞分析仪器都在增加新的技术和参数以满足临床在诊断和鉴别诊断方面的需求。目前有的仪器甚至可以提供40~50种测量或计算参数。
血液分析仪的主要分析原理:由于细胞为不良导体,根据血细胞非传导的性质,以电解质溶液中悬浮颗粒在通过小孔时引起的电阻变化为基础,进行血细胞计数和体积测定,这种方法称电阻法(也称库尔特原理)。把经过电解质溶液稀释的细胞悬液倒入一个不导电的容器中(塑料杯),把小孔管插入细胞悬液中,小孔管的内侧充满了稀释液,并有一个内电极,外侧细胞悬液中有一个外电极,当电流接通后小孔内外侧的电极形成稳定的电流,动力泵产生负压,开始充量吸样,稀释液通过小孔向内部流动,由于细胞为不良导体,当细胞通过小孔时,瞬时引起了电压变化而出现一个脉冲传导,称为通过脉冲,此时电压增加和变化的程度取决于非传导性细胞占据小孔感应区的体积,即细胞体积越大,引起的脉冲越大,所产生的脉冲振幅越高,再经过以下步骤得出结果。
①放大:细胞通过小孔时所产生的脉冲传导微弱,难以直接触发计数电路,必须经电子放大器把微伏信号放大成伏级信号。
②阈值调节:在一定范围内调节参考电平大小,使计数结果更加符合实际。
③甄别:各种微粒通过徽孔时均可产生讯号,讯号电平(脉冲幅度)与微粒子大小成正比,所谓甄别就是根据阈值调节器提供的参考电平,把低于参考电平的假讯号去掉,以提高准确性。
④整形:经放大和甄别的波形不一致,须经过整形器调整为形状一致标准的平顶波后才能触发电路,送入计数系统,得出计数结果。
⑤计数得出结果。