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试剂在血细胞分析中的作用及标准

来源:山东国康 作者:山东国康

试剂在血细胞分析中的作用及标准

  目前国内使用的血细胞分析仪基本上是进口产品且绝大部分采用电阻法。阻抗法计数细胞的原理是基于细胞在测试系统中产生的脉冲大小与仪器内设定的阈值比较而得出的数据,每个细胞检测时显示的脉冲大小除与细胞大小有关外(如粒细胞者最大,淋巴细胞最小),还与溶血剂的种类、稀释液的渗透压、离子强度、电导率、仪器出厂时仪器内固定的孔电流和脉冲增益等诸因素有关。换言之,上述任一参数的变化,均可导致脉冲的变化,致使细胞计数和分类计数的错误。因此,欲得到准确的结果,原则上应使用原仪器的配套试制。但如果国内开发出经过了原装试剂严格对照并经科学鉴定认可的自配试剂是可以使用的。自配试剂应符合以下几个条件。
 
  (1)自制试剂在成分和剂量上与配套试剂可能不尽相同,但同一份血液在配套试剂体系(稀释液+溶血剂)与自配试剂中细胞产生的脉冲信号应是相同的,与血细胞分类直方图应是相附的,细胞分类结果应一致,如达不到这一点.不能代替进口试剂。
 
  (2)在血细胞、血小板测试系统中,红细胞平均体积(MCV)、血小板平均体积(MPV)在两种试剂中所得结果应是相同的(如果仪器的计数阈值是可调的,至少应在允许的变异范围之内),空白计数应符合仪器的标准。
 
  (3)溶血剂溶解血细胞的程度、速度,以及血红蛋白与溶血剂作用后的吸收光谱与HiCN应相似,吸收峰值最好在540nm。
 
  (4)白配试剂的成分不应损坏仪器的部件或影响其使用寿命。
 
  血细胞分析仪细胞计数最适温度为18-22℃,低于15℃,高于30℃,均对结果有影响。全自动化仪器由于机内自动加入溶血剂并定时检测,可避免这个问题。但使用半自动仪器进行血细胞计数时,要在血液予以稀释后加入溶血剂,溶血后进行血细胞计数和分类计数,因此溶血剂用量及溶血时间至关重要。加溶血剂剂量不足或加后放置时问过短,致使溶血不完全;或时间太久,白细胞明显变形(通常阻抗法仪器分类是以白细胞体积作为分类依据的,加溶血剂后白细胞膜溶解,胞浆大部分溢出,整个细胞体积缩小,仅留下核和部分颗粒),发生计数误差,甚至仪器不能进行分类计数。

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