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【血球计数仪】试剂在全血分析中的作用

来源:山东国康 作者:山东国康

试剂在全血分析中的作用

      三分类血液分析仪使用的试剂一般分为稀释剂、溶血剂和清洗剂三种,优良的试剂质量是保证仪器的正常运行、日常维护及获得准确测试结果的重要条件。
 
      目前,国内使用的血液分析仪基本上是进口产品,且绝大部分而采用阻抗法。阻抗法计数细胞的原理如下:首先将细胞在测试过程中产生的脉冲大小与仪器设定的阈值进行比较,再根据处于阈值范围的脉冲的多少来判定细胞的数量,进而得出数据。脉冲的大小除与细胞的大小(如白细胞中粒细胞体积最大,淋巴细胞最小)有关外,还与溶血剂的种类,浓度、加入量、溶血时间及稀释剂的渗透压、离子强度、电导率、pH值、仪器出厂时固定的阈电压、孔电流和脉冲的增益等有关。
 
      绝大多数溶血剂的主要组成成分是一类强有力的表面活性剂物质,不同类别的表面活性剂对白细胞形态、大小影响不同,如十六烷基三甲基溴化铵能使白细胞失水、细胞膜皱缩、胞体缩小;而十四烷基三甲基溴化铵能使白细胞体积增大。反映在细胞计数时脉冲的大小变化,前者作用后的白细胞的脉冲小,后者作用后的白细胞的脉冲大。
 
      同一种溶血剂,浓度高低不同,对白细胞体积影响也不同,通常是随着溶血剂浓度增高,白细胞的体积逐渐缩小,测量时的脉冲也逐渐变。
 
      随着溶血剂的用量增加或溶血时间延长,白细胞的体积也逐渐缩小,测量时的脉冲也变小。这是因为在这两种情况下,白细胞膜破裂,皱缩在细胞核周围的胞浆颗粒及胞膜脱落,而仅剩细胞核。可见,溶血剂的第一作用是溶解红细胞,对白细胞进行适当修饰,进行白细胞计数分类。因此,欲获得准确的白细胞计数及分类结果,应使用配套溶血剂或与其性能相同的自制溶血剂。
 
      溶血剂的另一个作用是溶解红细胞,释放出血红蛋白。进行血红蛋白的测定。不同溶血剂的溶解红细胞程度及与Hb形成的Hb衍生物,能否用于准确进行Hb测定,是衡量溶血剂优劣的另一标准。
 
      稀释剂的组成相对简单,一般是由具有酸碱缓冲作用、适当的离子强度和电导串的等渗溶液组成。稀释剂只有与血浆相同的渗透压,能在一定时间内完整的保持血细胞原来的体积。而合适的电导率能保证获得与细胞体积相应的脉冲大小.稀释剂的配方成分不同,尽管能将其渗透压调整到与配套稀释剂一致,但其电导率也不可能相同,测试所获得的细胞脉冲大小也不会相同。
 
      稀释剂的配方成分不同,尽管也能将电导率调整到与配套稀释剂一致,但其离子强度,渗透压也不可能一致,同样影响测试结果。这些变化不仅影响MCV、PDW、MPV,还影响WBC计数及分类结果,应使用配套稀释剂或与其性能相同的自制稀释液。不同缓冲介质也可能产生不同的分类结果。

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